常规治疗剂在恶性黑色素瘤的治疗中很大程度上不能令人满意。最近，一种基于突变 BRAF 基因抑制剂的创新方法（代表黑色素瘤患者中最普遍的改变）从临床角度来看非常有希望。在这方面，一种新化合物达拉非尼/达拉菲尼已被证明对携带 BRAFV600E/K 突变的患者有效。我们在这里测试了达拉非尼抑制原代黑色素瘤细胞系细胞生长的能力，这些细胞系由患者的肿瘤组织建立并携带 BRAFV600D/R 突变。
方法：
测试了三种黑色素瘤细胞系：M257 野生型 BRAF、LCP BRAFV600R 和 WM266 BRAFV600D。MTT 测定是使用标准化方法进行的。为了评估 MAPK 途径的抑制和随后对细胞增殖的抑制，通过对用达拉非尼处理后的细胞系总蛋白提取物进行的蛋白质印迹分析来检查 ERK 的磷酸化。
结果：
我们的实验证明了达拉非尼/达拉菲尼的有效作用和对携带 BRAFV600D/R 突变的黑色素瘤细胞系中 MAPK 通路的抑制。
结论：
这些结果可能有助于增加可能受益于更有效的靶向治疗的黑色素瘤患者的数量。
在黑色素瘤中，MAPK 通路中最常见的突变成分是BRAF基因；其中，最普遍的BRAF突变（近 90% 的病例）表现为在 600 位用谷氨酸取代缬氨酸 (V600E)。这种氨基酸变化导致 BRAF 的致癌激活，其激酶活性增加，随后诱导下游 ERK 蛋白的磷酸化。组成性激活的 ERK 然后刺激细胞增殖和存活，维持肿瘤的维持和生长。剩余的BRAF突变主要以其他V600亚型（V600K、V600D和V600R）为代表，约占致病基因序列变异的8%。根据我们的经验，BRAF基因突变发生在 43% 的原发性黑色素瘤和 48% 的转移性黑色素瘤中。
使用一组源自切除的原发性和转移性肿瘤的黑色素瘤细胞系，我们研究了达拉非尼对培养的黑色素瘤细胞发挥抗增殖活性和阻断突变 BRAF 诱导的 ERK 信号传导的能力。在我们的分析中，LCP 黑色素瘤细胞系携带 BRAFV600R突变，而 WM266 黑色素瘤细胞系呈现 BRAFV600D变异;具有野生型BRAF的 M257 黑色素瘤细胞系用作对照。
在我们的系列中，达拉非尼/达拉菲尼在携带突变BRAF 的两种黑色素瘤细胞系（无论突变类型，BRAFV600D或 BRAFV600R）中均显示出显着的细胞增殖抑制作用，而在呈现野生型的对照细胞中缺乏显着的抗增殖作用BRAF。关于对 ERK 信号的干扰，与带有野生型BRAF 的对照细胞相比，带有 BRAFV600D/R突变的细胞系对磷酸化 ERK 的抑制更快更强。
据报道，达拉非尼/达拉菲尼对 BRAFV600E/K突变体具有特异性活性；这里提供的数据强烈表明 BRAFV600D/R突变也可能被包括为药物的有效靶点。然而，尽管 BRAFV600D/R突变构成了整个BRAF基因组致癌变异的一小部分，但从实用的角度来看，一种对更广泛的 BRAF 突变靶标有效的药物的可用性可能会有所帮助，允许临床医生扩大可能受益于更有效的靶向治疗的黑色素瘤患者的子集。
尽管在一系列有限的黑色素瘤细胞系上进行，我们的研究提供了证据表明达拉非尼/达拉菲尼可能对BRAF 的致癌变异发挥更广泛的抑制活性。微信扫描下方二维码了解更多：
请简单描述您的疾病情况，我们会有专业的医学博士免费为您解答问题（24小时内进行电话回访）