帕唑帕尼(Pazopanib)诱导小鼠急性肝毒性

　　为了阐明帕唑帕尼（Pazopanib）的代谢，基于超高效液相色谱与电喷雾电离四极杆质谱联用进行了代谢组学方法。

　　在体外和体内共鉴定出 22 种帕唑帕尼代谢物。在这些代谢物中，有 17 种是新的，包括几种半胱氨酸加合物和醛衍生物。通过使用重组 CYP 筛选，发现 CYP3A4 和 CYP1A2 是参与帕唑帕尼羟基化的主要形式。来自帕唑帕尼的半胱氨酸结合物 (M3)、醛衍生物 (M15) 和两种N-氧化物代谢物（M18和M20）的形成可诱导氧化应激，这可能是帕唑帕尼诱导的肝毒性的部分原因。

　　肝脏形态学观察提示帕唑帕尼（300 mg/kg）可引起肝损伤。帕唑帕尼（150、300 mg/kg）治疗后血清中天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶显着升高；这种肝损伤可以通过广谱 CYP 抑制剂 1-氨基苯并三唑 (ABT) 部分逆转。代谢组学分析表明，帕唑帕尼可显着改变肝脏中左旋肉碱、脯氨酸和溶血磷脂酰胆碱 18:1 的水平。此外，药物代谢相关基因表达分析显示，帕唑帕尼治疗显着降低了肝脏Cyp2d22和Abcb1a(P-gp) mRNA。

　　总之，本研究提供了帕唑帕尼（Pazopanib）代谢的全局视图及其对肝功能影响的线索。

　　本研究使用代谢组学方法系统地确定了帕唑帕尼（Pazopanib）的代谢图谱，并探索了与其副作用相关的潜在代谢物。数据表明，半胱氨酸加合物、醛衍生物和N-氧化物代谢物的形成有助于了解帕唑帕尼在临床中的肝毒性。与亲电子代谢物的发现一致，帕唑帕尼治疗会导致肝损伤，如血清 ALT 和 AST 升高所揭示的那样，并影响与肝脏生理功能相关的几种肝脏内源性代谢物的水平，包括左旋肉碱、脯氨酸和 LPC 18 :1。

　　代谢组学是全面分析药物代谢物和鉴定与肝损伤相关的内源性代谢途径的有力工具。通过使用该策略，本研究发现了帕唑帕尼的一系列羟基化、去甲基化、加氢甲酰化和葡萄糖醛酸化代谢物。在小鼠尿液中共鉴定出 17 种代谢物（M1-7、M10-11和M15-22），17 种代谢物（M1-11、M14-16和M18-20）在粪便中观察到和5种代谢物（MI-2，M4-5和M13）在血清中发现。此外，在血清、粪便和尿液中检测到未改变的帕唑帕尼，并且基于代谢物和母体化合物的丰度表明该药物主要在粪便中排泄。这些代谢物的化学结构通过 MS/MS 碎片分析确定和表征。体内的主要代谢途径是羟基化，然后是去甲基化。在这些代谢物中，9 种为 II 期代谢物，包括与半胱氨酸、甘氨酰半胱氨酸、N-乙酰半胱氨酸、葡萄糖和葡萄糖醛酸。尽管葡萄糖和葡萄糖醛酸结合物可能会增加药物的极性和亲水性，并有助于母体药物的排泄。帕唑帕尼在治疗后 24 小时仍可在肝脏中检测到，剂量为 150 mg/kg，相当于临床剂量。这些数据表明，长期重复给药帕唑帕尼可能会导致帕唑帕尼在肝脏中蓄积。

　　本研究表明，CYP3A4 和 CYP1A2 是促成帕唑帕尼（Pazopanib）代谢的主要酶。帕唑帕尼（150、300 mg/kg）治疗后血清中升高的 AST 和 ALT 显着增加，这也可以被 CYP 广谱抑制剂 ABT 部分逆转。这些结果表明，介导代谢激活的 CYPs 在帕唑帕尼诱导的肝毒性中起关键作用。考虑到 CYP3A4 参与帕唑帕尼羟基化和二甲基化代谢物的形成，当帕唑帕尼与 CYP3A4 底物或抑制剂或调节肝脏和肠道 CYP3A4 表达的孕烷 X 受体 (PXR) 激活剂共同给药时，应监测药物相互作用。建议当帕唑帕尼（Pazopanib）与作为 CYP3A4 底物或抑制剂的药物一起给药时，应减少帕唑帕尼的剂量。大多数酪氨酸激酶抑制剂主要通过 CYP3A4 代谢，包括伊马替尼 、吉非替尼和达沙替尼。CYPs 筛选显示 CYP3A4 和 CYP1A2 在M1和M2的形成中起主要作用，然后进一步转化为反应性醛代谢物。此外，CYP1A2 和 CYP3A4 诱导剂分别通过芳烃受体和 PXR 可能会加速这些醛代谢物的形成，从而增加帕唑帕尼相关的毒性。因此，目前的数据表明，在接受其他 CYP3A4 和 CYP1A2 底物或调节剂的患者中应谨慎使用帕唑帕尼。

　　总之，本研究提供了帕唑帕尼（Pazopanib）诱导的小鼠不良反应的代谢组学观点。这里的数据表明帕唑帕尼的肝毒性可能是由半胱氨酸结合物、醛衍生物和N-氧化物代谢物的形成引起的，它们可以诱导氧化应激。CYP3A4 和 CYP1A2 被证明是促进帕唑帕尼代谢的主要酶。对于接受 CYP3A4 和 CYP1A2 调节剂的患者，应监测帕唑帕尼的使用情况。微信扫描下方二维码了解更多：